다음 LinkOut 리소스는 외부 공급자에 의해 제공됩니다. 이러한 공급자는 링크를 유지 관리할 책임이 있습니다. 정제된 단백질은 인라인 MiniDawn MALLS 검출기(Wyatt Technology) 및 와이엇 굴착계를 사용하여 Superose-12 10/30 크기 배제 컬럼(GE Healthcare)을 사용하여 크기 배제 크로마토그래피를 실시하였다. 단백질은 0.5 mL min-1의 유량을 사용하여 pH 8.0, 50 mM NaF 및 0.5 mM TCEP-HCl에서 20 mM 트리스 아세테이트에서 용출되었다. 중량 평균 분자량은 굴절률의 변화와 함께 산란된 광의 세기를 사용하여 계산하였다. 검출기에서의 단백질 농도는 굴절률의 변화에 의해 결정되었다. . 이러한 참조 서열은 게놈 어노베이션 주기와 독립적으로 선별되므로 그들의 버전은 현재 게놈 빌드에서 RefSeq 버전과 일치하지 않을 수 있습니다. 이 섹션의 RefSeq 버전을 게놈 영역, 성적 증명서 및 위의 제품에 보고된 버전과 비교하여 버전 불일치를 식별합니다. XRCC5 및 XRCC6 이종과 복합체에서 확인.

약전유전학 및 약전유전체학 지식 자료 . 중 하나 또는 둘 다 LIM 도메인을 포함하는 LMO4의 재조합 형태는 LDB1 또는 CtIP로부터 상호 작용하는 펩티드 도메인이 유연한 링커[19], [43]를 통해 LMO4로 연결되는 테더링 복합체로 표현되지 않는 한, 용해성이 나거나 응집되기 쉬운 경향이 있다. 우리는 LMO4•DEAF1 복합체를 엔지니어링하기 위해 동일한 전략을 사용했습니다. LMO4와 DEAF1404-438의 LIM 도메인을 모두 포함하는 다양한 LMO4•DEAF1 단지가 생성되었습니다. 이러한 복합체 중 일부는 수용성 발현 및 예비 구조 특성측면에서 약속을 보였지만(도 1. 파일 S2에서 S1) 상세한 구조적 특성화를 위해 충분히 안정적이지 않았다. 특히, 이들 단백질은 질량분석법에 의해 결정된 DEAF1의 K418에서 단백질성 절단에 걸리기 쉬웠다(시드니 대학 프로테오믹스 연구부; 수브루). LMO4•DEAF1404-438의 K418Q 돌연변이체는 단백질 분해를 방지하기 위한 노력으로 생성되었지만, 이 단백질은 불용성이었다. 우리의 효모 2 하이브리드 데이터가 결합이 주로 LMO4LIM2및 DEAF1404-438의 N 말단 절반에 의해 매개된다는 것을 나타내기 때문에, 우리는 이 도메인만 포함하는 단백질 구성을 생성했습니다. 우리는 두 방향모두에서 이러한 단지를 설계했습니다 (LMO4LIM2 •DEAF1404-418 및 DEAF1404-418 •LMO4LIM2, 이름의 도메인 순서는 구문의 순서에 해당합니다.

도 3a). 두 테더링 된 복합체는 다각형 레이저 광 산란 (SEC-MALLS)과 함께 크기 배제 크로마토그래피를 실시했습니다. 두 구성 모두 이론적 분자량(LMO4LIM2•DEAF1404-418 = 10.1 kDa 및 DEAF1404-418•LMO4LIM2 = 9.3 kDa) 및 관찰된 실험 분자량(LMO4LIM2•DEAF) 1404-418 = 10.7±0.8 kDa 및 DEAF1404-418•LMO4LIM2 = 10.1±0.6 kDa)는 단백질이 우세하게 단조롭다는 것을 나타내는 우수한 합의에 있었다(그림..